以下是關于大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：

　　BS-3471 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法：用純化的大鼠sLR抗體包被微孔板形成固相抗體，依次加入樣本、HRP標記的抗體，形成復合物后通過TMB顯色，顏色深度與樣本中sLR濃度正相關。

　　二、試劑盒組成

　　預包被微孔板?：含固相抗體

　　標準品?：濃度梯度通常為80、40、20、10、5、2.5 U/L

　　檢測抗體?：HRP標記的sLR抗體

　　顯色底物?：TMB溶液

　　終止液?：酸性溶液(如2M H?SO?)

　　洗滌緩沖液?：PBS或TBS配方

　　三、樣本處理要求

　　樣本類型?：血清、血漿(肝素/EDTA抗凝)、組織勻漿液

　　采集注意事項?：

　　避免溶血，室溫血液凝固10-20分鐘后離心(2000-3000 rpm，20分鐘)

　　長期保存需-20°C分裝，避免反復凍融

　　稀釋建議?：通常按1:5~1:20稀釋，高濃度樣本需進一步稀釋

　　四、實驗步驟

　　加樣?：

　　每孔加入50μL標準品或樣本，設雙復孔

　　孵育?：37°C溫育1小時，洗滌3次

　　酶標抗體結合?：加入HRP標記抗體，37°C孵育30分鐘

　　顯色?：加入TMB底物避光反應15分鐘

　　終止與檢測?：加終止液后15分鐘內測450nm OD值

　　五、注意事項

　　質量控制?：

　　每板需設空白孔、標準曲線孔和質控樣本

　　標準曲線R2應≥0.99

　　操作規范?：

　　避免底物接觸金屬器械，終止液有腐蝕性需防護

　　開封后未用完板條需密封干燥保存

　　數據計算?：

　　以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制曲線，用四參數擬合計算樣本濃度

　　六、技術參數

　　檢測范圍?：通常2.5-80 U/L

　　靈敏度?：<1.0 U/L(不同品牌可能有差異)

　　批內/批間差?：CV<10%

　　如需具體品牌(如天津本生、天正信達生物等)的差異說明，可進一步提供補充信息。

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